２０１０年ｌ２月 Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０ｌＯ 色 谱 Ｖｏ１．２８ ＮＯ．１２ ¨９２～¨９５ 技术与应用 ＤＯＩ！ｌ０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１ ｌ２３．２０１０．０ｌ ｌ９２ 摘要：为了考察水飞蓟全草不同部位的组成特征，采用不同的提取溶剂对水飞蓟的幼草、根、茎、叶、花、种子等不同 部位提取后，通过高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）进行分析。以Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２色谱柱（２５０ ｍｉｌｌ Ｘ４．６ ｍｎｌ，５ ｍ）为分 离柱，以５０ ｍｍｏＬ／Ｌ磷酸二氢钾溶液和甲醇为流动相，梯度洗脱，检测波长为２５４ ｎｍ。在此条件下，水飞蓟不同部 位的样品得到了很好的分离，发现不同部位组成差别很大，得到的组分数从幼草、种子、花、叶、根、茎依次减少。水 飞蓟不同部位所含的组分极性有很大差别，不同提取方法得到的样品组成也有较大差别。实验结果可为水飞蓟全 草的指纹图谱构建及应用开发提供实验依据。 关键词：高效液相色谱；组分；水飞蓟；中草药 中图分类号：０６５８ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ０００—８７１３（２Ｏｌ０）ｌ２—１ｌ９２—０４ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ， ａ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ（ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｅｎｄｅｒ ｓｐｒｏｕｔｓ，ｒｏｏｔｓ，ｓｔｅｍｓ，ｌｅａｖｅｓ，ｆｌｏｗｅｒｓ，ｓｅｅｄｓ，ｅｔｃ．）ｏｆ Ｓｉｌｙ— ｂｕｍ ｍａ￣ｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ ｗｉｔｈ ｄｆｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏ— ｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ．Ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｅｘｉｓｔｅｄ ｉｓ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｅｎｄｅｒ ｓｐｒｏｕｔｓ，ｓｅｅｄｓ，ｆｌｏｗｅｒｓｌｅａｖｅｓ，ｒｏｏｔｓ，ｓｔｅｍｓ．Ｔｈｅ ，ｏｂｖｉＯＩｌＳ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｏｌａｒ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｎａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍ— ｐｏｕｎｄｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｗｉｌｌ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐ— ｍｅｎｔ ｏｆ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）；ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ；Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａ？’ｉａ— ｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ；Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａ１ ｍｅｄｉｃｉｎｅ 水飞蓟（ ｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ）， 水飞蓟宾是其生物活性的主要有效成分 ，具有清 除自由基 、抗脂质过氧化、保护肝细胞膜、促进肝 细胞修复再生 、抗肝纤维化 、抗肿瘤、降血脂、 预防糖尿病等功能－－…。 别名乳蓟、奶蓟，为菊科水飞蓟属一二年生草本植 物。水飞蓟原产于南欧和 匕非。我国于１９７２年引 种紫花水飞蓟，现已在陕西、黑龙江、辽宁、新疆和山 西等地推广种植。水飞蓟全草可用于治疗肿疡及丹 毒；种子及提取物对于肝脾疾病有良好疗效，可以降 低异常升高的转氨酶¨’ 。研究表明水飞蓟全草含 有黄酮类化合物及延胡索酸 ；种子含有以水飞蓟 素为主的黄酮类化合物 和以亚油酸为主的水飞 蓟油 。现代药理学研究也证实水飞蓟种子中的 药用水飞蓟素大多采用有机溶剂萃取或加热回 流的提取方法得到，在水飞蓟素的提取方法中乙酸 乙酯提取法和醇提法川 最为常用。史劲松等 采 用乙酸乙酯－超声辅助浸提法提取水飞蓟种皮中的 水飞蓟素，可以在较短的时间达到超过７０％的提取 率。以往报道大多集中在对水飞蓟种子的研究上， 通讯联系人：张维冰，博士，教授．Ｅ・ｍａｉｌ：ｌｙｊ３１０＠１６３．ｃｏｍ，ｗｅｉｂｉｎｇｚｈａｎｇ＠ｅｃｕｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ． 基金项目：国家自然科学基金项目（Ｎｏ．２０６７５０８３）和国家重点基础研究发展规划（“９７３”计划）项目（Ｎｏ．０ＩＣＢ５ｍ２０２） 收稿日期：２０１０－０９－０９ 第ｌ２期 王芸，等：水飞蓟全草不同部位的组成特征 ・ｌ１９３・ 而对其他部位的研究相对较少。由于欧洲民间有食 用去刺后的水飞蓟叶和用水飞蓟花作为药用的传 统，因此提示水飞蓟不同部位可能具有不同的功效。 本文采用不同极性的溶剂对水飞蓟的不同部位进行 提取之后进行高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分析，系统地 探讨水飞蓟不同部位的组成特征，为水飞蓟生药资 源的开发提供一定参考。 １ 实验部分 １．１仪器与试剂 １２０１梯度高效液相色谱系统，包括Ｐ１２０１高压 恒流泵、ＵＶ１２０１紫外－可见波长检测器、７７２５ｉ手动 进样阀、ＺＷ ＩＩ柱温箱和ＥＣ２００６工作站（大连依利 特分析仪器有限公司）；实验用水由超纯水仪（德国 Ｓａｒｔｏｒｉｏｕｓ公司）制备；用于ＨＰＬＣ分析的甲醇为色 谱纯；其余药品均为分析纯。 水飞蓟全草和种子购于陕西西安中药材市场， 经鉴定为菊科植物水飞蓟的全草和瘦果。水飞蓟幼 草由加拿大友人提供。 １．２样品溶液的制备 对水飞蓟幼草、根、茎、叶、花和种子分别采用热 回流法进行提取。 将上述不同部位的样品粉碎后，在４０℃条件下 干燥至恒重。精确称取样品粉末１．０００ ｇ，加入提取 溶剂１００ ｍＬ，水浴加热回流４ ｈ，提取溶剂分别为 ７５％（体积分数，下同）甲醇溶液、乙醇、乙酸乙酯和 纯水，所对应的提取温度分别为８０、７８、７５、１００ ｏＣ。 重复提取两次，并将提取液合并。抽滤，滤液经减压 蒸馏后定容到１０ ｍＬ，待测液采用孔径为０．４５ ｍ 微膜过滤后备用。 １．３ 色谱条件 色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ， ５ ｍ）。流动相：Ａ为５０ ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶 液，Ｂ为甲醇。梯度洗脱程序：０～５ ｍｉｎ，Ｏ％Ｂ； ５～８０ ｍｉｎ，０～４５％Ｂ；８０～１２０ ｍｉｎ，４５％Ｂ～ １００％Ｂ。流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ。检测波长：２５４ ｎｍ。 柱温：２５℃。进样量：５０ Ｌ。 ２结果与讨论 ２．１色谱条件的选择 近年来ＨＰＬＣ法已广泛用于中药组分的研究 中¨ ” 。本文以水飞蓟幼草提取物为样品，对流动 相组成与洗脱程序进行考察。水飞蓟幼草提取物的 成分复杂，使用等度条件洗脱仅能得到少数严重重 叠的色谱峰，因此需采用梯度程序洗脱。考察流动 相体系分别为甲醇一水、甲醇－０．１％乙酸、甲醇一５０ ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液时，以及ｐＨ为４．５、５．０、 ５．５、６．０、６．５时样品的分离效果，结果表明以甲醇一 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液为流动相、ｐＨ为６．０时 色谱峰峰形尖锐，出峰数量最多，分离度最好。 比较２１４、２５４和２８７ ｎｍ波长条件下的色谱图， 在２５４ ｎｍ波长下色谱图基线稳定，包含的信息量 较大，峰信号强，因此选择２５４／ｌｍ作为检测波长。 ２．２水飞蓟幼草的不同溶剂提取组分分析 乙酸乙酯可完全提取水飞蓟幼草中弱极性组 分，由图１ａ可知，色谱峰大都在１００～２００ ｍｉｎ出 峰，同时此处的色谱峰信号较弱，说明水飞蓟幼草中 含有的疏水性弱极性组分较少。乙醇提取物的色谱 峰主要集中在４０～１ｌ０ ｒａｉｎ（见图１Ｃ），但组分分布 不均匀；由于乙醇属于中等极性的溶剂，因此中等极 性的组分在谱图上都有所体现，且含量较高。水飞 蓟幼草中含有生物碱等强极性组分，可被水提取，但 是水对非极性及中等极性组分的提取效果较差，因 此以水为提取溶剂的提取物出峰也主要集中在谱图 前半部分（见图ｌｂ）。以７５％甲醇为提取溶剂时， 强、中等、弱极性组分均可被提取出来，整个色谱图 中色谱峰分布较均匀且强度大（见图１ｄ）。对比水 和乙醇的提取结果，说明７５％甲醇可对样品中各种 极性的组分进行有效的提取，可得到更多信息。谱 图中色谱峰的分布情况也显示水飞蓟幼草中组分的 极性差异范围很大，中等与强极性组分相对较多，而 弱极性组分较少。 图１ 不同提取溶剂条件下水飞蓟幼草提取物的色谱图 Ｆｉｇ．１ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｎｄｅｒ ｓｐｒｏｕｔｓ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉ ｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．） Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌ— ｖｅｎｔｓ ａ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ；ｂ．ｗａｔｅｒ；ｃ．ｅｔｈａｎｏｌ；ｄ．７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ ・ｌ１９４・ 色 谱 第２８卷 ２．３水飞蓟种子的不同溶剂提取组分分析 极性及亲脂性组分，其中最主要的是亲水性的组分， 中等极性组分次之，亲脂性组分最少。除种子外，欧 美民间也用水飞蓟花作为药物。由于花中常含有大 水飞蓟种子中主要含水飞蓟油及黄酮类化合物 等成分。水飞蓟油的含量约为２６％，其中含亚油酸 ４６．４６％、亚麻酸２．４６％ ；黄酮类化合物等主要组 分为水飞蓟素，水飞蓟素为黄酮木脂素类组分。由 图２ｄ可知，７５％甲醇提取出的组分较多，分布均匀， 多为中等极性和疏水性组分，水飞蓟的有效成分集 中在８０～１００ ｍｉｎ之间。从图２ａ～ｄ可以明显看 出，乙醇对黄酮类组分的提取率高于其他３种溶剂。 乙醇提取的组分可分为３簇，每簇都含有许多小峰， 可推测其性质、结构相似。水飞蓟种子中的组分主 要以亲脂性成分居多，并含有少量中等极性的组分。 ｆ｛ｒａｉｎ 图２不同提取溶剂条件下水飞蓟种子提取物的色谱图 Ｆｉｇ．２ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉ ｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ；ｂ．ｗａｔｅｒ；ｃ．ｅｔｈａｎｏｌ；ｄ．７５％ｍｅｔｈａｎｏ１． ２．４水飞蓟花的不同溶剂提取组分分析 由图３可知，水飞蓟花中含大量的亲水性、中等 图３不同提取溶剂条件下水飞蓟花提取物的色谱图 Ｆｉｇ．３ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌｏｗｅｒ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ／ｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｔｒａｃ－ ｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ：ｂ．ｗａｔｅｒ；ｃ．ｅｔｈａｎｏｌ：ｄ．７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ 量色素，因此水飞蓟花的水提取物中亲水性组分可 能大部分为水溶性色素，对药物活性贡献不大。水 飞蓟中活性成分主要为亲脂性组分，而花中亲脂性 组分较少。因此中等极性组分可能对药物活性有较 重要的贡献。４种提取溶剂中，乙醇对水飞蓟花中 中等极性组分的提取率最高，对亲脂性组分也有一 定的提取效果，能得到更多有关水飞蓟花中组分的 信息。 ２．５水飞蓟叶的不同溶剂提取组分分析 实验中发现，水飞蓟叶中含有的组分主要为疏 水性化合物，亲水性的组分其次，中等极性的组分较 少。水飞蓟叶的谱图（见图４）与幼草的谱图（见图 １）相比较，水提样品共有峰有ｌ０个，从４４～１３２ ｍｉｎ的组分数都明显减少；乙酸乙酯提取物谱图共 有峰有６个。除了疏水性的组分没有减少外，其他 各组分的含量都明显较少。这一结果说明尽管水飞 蓟生长过程中其叶片中有一些组分被保留，但在色 谱图中８０～１００ ｍｉｎ的黄酮类组分用４种提取溶剂 都没有发现，证实在水飞蓟叶中类黄酮类化合物组 分已经转移。 ｔ｛ｍｉｌｌ 图４不同提取溶剂条件下水飞蓟叶提取物的色谱图 Ｆｉｇ．４ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｌｅａｆ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉ ｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ；ｂ．ｗａｔｅｒ；ｃ．７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ；ｄ．ｅｔｈａｎｏ１． ２．６水飞蓟茎的不同溶剂提取组分分析 茎输导的大多数都是分子较小而且能溶于水的 有机物，如小分子的葡萄糖、氨基酸、甘油和脂肪酸 等简单的有机物。采用４种不同溶剂提取水飞蓟茎 的色谱分离结果（见图５）也证实了这一点。可以看 出水飞蓟茎中化合物的种类和含量均比种子、花和 第１２期 王 芸，等：水飞蓟全草不同部位的组成特征 ・１ ｌ９５・ 帕印ｍ ｉｎ 之前，中等极性和疏水性的组分较少。 ＞ 宴 ＼ ．呈ｐ ∽ Ｏ ２Ｏ ４０ ６０’ ８Ｏ １ＯＯ ｌ２Ｏ １４Ｏ ｔ／ｍｉｎ 图５不同提取溶剂条件下水飞蓟茎提取物的色谱图 Ｆｉｇ．５ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉ ｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ Ｉ Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ＳＯｌｖｅｎｔｓ ａ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ；ｂ．ｗａｔｅｒ；ｅ．７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ；ｄ．ｅｔｈａｎｏ１． ２．７水飞蓟根的不同溶剂提取组分分析 由图６可以看出，用７５％甲醇溶液作为溶剂的 提取物的谱图中，从开始到结束的１４７ ｍｉｎ内共有 ｌ２５种组分被检出。水飞蓟根中以疏水性的组分最 多，因此乙酸乙酯对疏水性的组分提取效率较高。 欧美民间有利用水飞蓟根治疗忧郁症等精神类 疾病的传统，由乙酸乙酯提取谱图中可以得到多于 ２Ｏ个组分，推断水飞蓟根中有效的药效组分为疏水 性的脂溶性成分，而且含量较高，这一结果可以为今 后对水飞蓟根的药用价值的评价提供参考。 ＞ 基 ＼ ∞ Ｏ ２Ｏ ４０ ６０ ８Ｏ １Ｏ０ １２０ ｌ４０ ｆ／ｍｉｎ 图６不同提取溶剂条件下水飞蓟根提取物的色谱图 Ｆｉｇ．６ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍ口砌舢珊（Ｌ・）ＧａｅｒｔＳＯｌｖｅｎｔｓ ｎ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｄ溉ｒｅｍ ａ．７５％ｍｅｔｈａｎｏｌ；ｂ．ｗａｔｅｒ；Ｃ．ｅｔｈａｎｏｌ；ｄ．ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ． ３结语 一～ 以７５％甲醇溶液、乙醇、乙酸乙酯和纯水为提 取溶剂分别对水飞蓟幼草、种子、花、叶、茎、根６个 部位加以提取，并进行ＨＰＬＣ分析，考察提取效果及 不同部位组成的差异。结果表明水飞蓟各部位的出 峰数量从多到少的排序为：幼草、种子、花、叶、根、 茎。由于不同部位组分的差异，应采取不同的溶剂 进行提取，才能更充分地提取出有效成分。通过对 所得到的色谱图的综合评价，为水飞蓟药材有效成 分的组成提供了一种直观、简便的方法，从而为水飞 蓟的相关药效研究、指纹谱图构建提供了基础依据。 参考文献： ［１］Ｍｉｎａｋｍｅｔｏｖ Ｒ Ａ，Ｏｎｕｃｈａｋ Ｌ Ａ，Ｋｕｒｋｉｎ Ｖ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｃｈｅｍ Ｎａｔ Ｃｏｍｐ，２００１，３７（４）：３１８ ［２］ Ｗａｎｇ Ｂ Ｅ，Ｘｉｅ Ｘ Ｃ，Ｄｕａｎ Ｚ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ（王 宝恩，谢贤春，段钟平，等．药品评价），２００７，４（２）：６８ ［３］ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ：Ｈｅｒｂａ Ｓｉｌｙｂｉ．［２００９－０９－０８］．ｈｔｔｐ：／／ ｗｗｗ．ｗｉｋｉ８．ｃｏｍ／ｓｈｕｆｆｅｉｊｉ＿２２８２５／ ［４］ Ｋｅ Ｍ Ｑ．Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ． Ｃｈａｎｇｓｈａ：Ｈｕｎａｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｅｓｓ（柯铭清． 中草药有效成分理化与药理特性．长沙：湖南科学技术出版 社），１９７９ Ｈｅ Ｗ Ｍ，Ｘｕ Ｍ Ｄ，Ｙａｎｇ Ｑ，ｅｔ ａ１．Ａｃｔａ Ｎｕｔｒｉｍｅｎｔａ Ｓｉｎｉｃａ （何维明，许牡丹，杨菁，等．营养学报），１９９６，１８（２）：１６３ Ｋｉｄｄ Ｐ，Ｈｅａｄ Ｋ．Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｒｅｖｉｅｗ，２００５，ｌ０ （３）：１９３ Ｙｕ Ｌ Ｃ．Ｇｕ Ｃ Ｈ．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＨｏｓｐｉａｔｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ（于 乐成，顾长海．中国医院药学杂志），２００１，２１（８）：４９３ Ｋｒｅｎ 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